胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠 4B 說明書
更新時(shí)間:2010-04-21 | 點(diǎn)擊率:2841
胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠 4B
一、 簡介
本公司生產(chǎn)的胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B是把高純度的胰蛋白酶固定到活化好的瓊脂糖凝膠上,它可以用于酶切,同時(shí)也可以可以純化一些能和它結(jié)合的物質(zhì),如絲氨酸蛋白酶抑制劑等。
二、 親和填料特性:
特點(diǎn) | 基團(tuán)脫落少,結(jié)合特異性強(qiáng) |
配基 | 胰蛋白酶 |
配基密度 | ≤10mg/ml |
親和填料的顆粒大小 | 45-165μm |
大流速 | 300cm/h |
pH范圍 | 1.5-10,在位清洗時(shí)pH范圍可到1.5-10 |
使用溫度 | 4℃~常溫 |
保存溫度 | +4~8℃ |
保存液體 | 20%乙醇 |
三、 適用范圍:
胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B用于純化各種于之結(jié)合的物質(zhì),如酶抑制劑等。
四、 親和填料應(yīng)用的注意事項(xiàng):
1、凝膠從冷室或冰箱中取出后好在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫,然后再裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、吸附:20-50mM,pH7.4-8.0含0.2-0.5M NaCL的緩沖液,常用的為Tris-HCl緩沖液。
3、洗脫:可以用濃度為0.2-2M 的pH1.5-5左右的酸性緩沖液進(jìn)行階段或者線性洗脫。
4、上樣樣品必須與平衡柱子的緩沖液的pH、電導(dǎo)相同。
5、不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。
6、胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B親和填料的再生處理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3個(gè)床體積,后用3M NaCL洗 3個(gè)床體積即可。如果再生的效果還不好,也可以用0.2-0.5M pH1.5的緩沖液沖洗3-5個(gè)柱床體積,然后再用水清洗,保存在20%乙醇中即可。長期不用好加抑菌劑如0.2%疊氮鈉,酸洗柱子的時(shí)間不能太長,否則會(huì)縮短填料的壽命。
7、該親和填料保存條件為20%乙醇,+4~8℃。