線粒體DNA提取試劑盒使用過(guò)程中注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2021-03-01 | 點(diǎn)擊率:3672
線粒體DNA提取試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明:
線粒體DNA提取的關(guān)鍵是盡可能的去掉核DNA。利用差速離心到比較純凈的線粒體,再利用DNA酶消化裂解緩沖系統(tǒng)等多步驟去掉核DNA,后得到純凈的線粒體DNA??捎糜赑CR等對(duì)純度要求較高的實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒用于從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞線粒體DNA的提取制備。不適合植物及其他標(biāo)本的提取。
在使用線粒體DNA提取試劑盒注意事項(xiàng):
1.為保證獲得完整及盡可能多的線粒體,勻漿條件要示:一是全程低溫操作。二是快速。三是如用條件可將勻漿后的碎片在顯微鏡下觀察。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時(shí)較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2.線粒體DNA本身含量很低,如果電泳檢測(cè)不到,可加大上樣量,用更少量的TE溶解沉淀,或者直接進(jìn)入PCR檢測(cè)。
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