BCA 法蛋白含量測定試劑盒 說明 技術(shù)文章
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BCA 法蛋白含量測定試劑盒
商品貨號:QS3202
英文名稱:BCA Protein Assay Kit
別名:BCA法蛋白含量測定試劑盒
檢測方法:常量法
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價 | 選擇規(guī)格 |
---|---|---|---|---|
QS3202-50管/48樣 | 索橋生物 | 50管/48樣 | ¥100.00元 |
產(chǎn)品詳細介紹
測定意義:
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
測定原理:
堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰大。
產(chǎn)品說明書
貨號: QS3202 規(guī)格:50 管/48 樣
BCA 法蛋白含量測定試劑盒說明書 可見分光光度法
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,
測定意義:
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量 分析。
測定原理:
堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將 Cu2+還原成 Cu+; 2 分子的 BCA 與 Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在 540-595nm 有吸收峰,562nm 處吸收峰大。
自備實驗用品及儀器:
臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑 A:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑 B:液體 1mL×1 支,4℃保存。
標準蛋白:液體 2 mL×1 支,4℃保存。
工作液配制:臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×1 mL),將試劑 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,蓋緊后充分混勻。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取:
1. 液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。
2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織, 加入 1mL 提取液(自備),根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水) 冰浴勻漿,8000g,4℃離心 10min,取上清,即待測液。
3. 細菌、細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。
測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長到 562 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液置于 60℃水浴預(yù)熱 30 min。
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
蒸餾水(μ L) | 20 | ||
標準品(μ L) | 20 | ||
待測液(μ L) | 20 | ||
工作液(μ L) | 1000 | 1000 | 1000 |
混勻后置于 60℃保溫 30min,于 1mL 比色皿在 562nm 處測定吸光值 A,分別記為 A 空白管、A 標準管、A 測定。 |
注意:空白管和標準管只需要做一次。
計算公式:
Cpr (mg/mL) = C 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) = 0.5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)
Cpr (mg/g)= C 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷ W = 0.5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷ W
W: 樣本質(zhì)量,g
注意事項:
BCA 法蛋白含量測定試劑盒,適用于測定蛋白濃度在 20-5000μ g/ml 樣品。測定前取 1-2 個樣 做預(yù)實驗,若 A 測定管-A 空白管﹥1.5,需將樣本用提取液稀釋后再測定,以確保測定的準 確性。
蛋白含量測定系列 | 價格 | |||
QS3200-50 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 60 |
MS3200 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 100 |
QS3201-50 | 考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 60 |
MS3201 | 考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 100 |
QS3202 | BCA蛋白法含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 100 |
MS3202 | BCA蛋白法含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 190 |