ELISA樣本處理及要求

樣本處理及要求 ：
1. 血清 ： 室溫血液自然凝固 10-20 分鐘 ， 離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。 仔細(xì)收集上
清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離 心
20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次
離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程
中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清 ： 檢測(cè)分泌性的成份時(shí) ， 用無(wú)菌管收集 。 離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉(zhuǎn) /
分 ） 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右 。 通過(guò)反復(fù)凍融 ， 以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份 。 離心 20 分
鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本 ： 切割標(biāo)本后 ， 稱取重量 。 加入一定量的 PBS ， PH7.4 。 用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8 ℃ 的溫度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ） ，用手工或勻漿器
將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待
檢測(cè)，其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上
進(jìn)行試驗(yàn)，可 將標(biāo)本放于 -20 ℃ 保存，但 應(yīng) 避免反復(fù)凍融 .
7.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品 ，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（ HRP ）活性。